Диссертация
Лю Вэньсюэ
Кандидат наук
Статус диссертации
Доктор наук Профессор
Рубин Андрей Борисович
Академик РАН Доктор наук Профессор
Доктор наук Профессор
Гудилин Евгений Алексеевич
Член - корреспондент РАН Доктор наук Доцент
Агафонов Михаил Олегович
Доктор наук
биологические науки
Разработанный подход инактивации гена оксидазы D-аминокислот в дрожжах H. Polymorpha использован для получения нокаутных генов DAAO, их генетической и физиологической характеристики, а также для подтверждения субстратной специфичности оксидазы H. polymorpha и изучения конформации белков и флавинов in vitro. Установлено, что использование подложки из коллоидных наночастиц серебра позволяет увеличить чувствительность КР в 105-106. В ходе взаимодействия флавина с субстратом происходит изменение его конформации, сопровождающееся смещением максимума SERS-спектра 1252 см-1 в длинноволновую область. При взаимодействии DAAO с D-аланином изменения конофрмации флавина выявлены в течение более короткого промежутка времени, чем при взаимодействии с D-серином. Методом однофотонного счета обнаружено уменьшение амплитуды флуоресценции триптофана при активации DAAO. С помощью ИК-спектроскопии выявлено изменение вклада полос амида 1 и амида 2 при активации обоих типов DAAO.
| # | Название | Размер |
|---|---|---|
| 1 | Протокол приема диссертации к защите | 57 KB |
| 2 | Автореферат | 2 MB |
| 3 | Диссертация | 4 MB |