Диссертация

Медведева Мария Витальевна

Кандидат наук

Статус диссертации

  
Диплом Кандидат наук
  
Решение о выдаче диплома
  
Положительное заключение АК
  
На рассмотрении в АК
  
Положительная защита
29.10.2024 
Объявление опубликовано
23.10.2024 
Принят к защите
22.10.2024 
Заключение комиссии
14.10.2024 
Документы приняты
Тема диссертации

S-нитрозилирование глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы

ФИО соискателя
Медведева Мария Витальевна
Степень на присвоение
Кандидат наук
Дата и время защиты
04.12.2024 17:00
Место проведения защиты
119234, Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 73,¶Факультет биоинженерии и биоинформатики, ауд. 221
Научный руководитель
Муронец Владимир Израилевич
Доктор наук Профессор
Шмальгаузен Елена Викторовна
Кандидат наук Доцент
Оппоненты
Байков Александр Андреевич
Доктор наук Профессор
Тишков Владимир Иванович
Доктор наук Профессор
Калинина Елена Валентиновна
Доктор наук Профессор
Место выполнения работы
Московский государственный университет имени М.В.Ломоносова, Научно-исследовательский институт физико-химической биологии им. А.Н.Белозерского, Отдел биохимии животной клетки
Специальность
1.1.10. Биомеханика и биоинженерия
биологические науки
Диссертационный совет
Телефон совета
+7 495 939-13-57

Оксид азота (NO) играет важную роль в регуляции многих процессов, происходящих в живых организмах. Многие аспекты влияния NO на белки остаются недостаточно исследованными из-за нестабильности главного продукта их модификации при S-нитрозилировании сульфгидрильных групп остатков цистеина.

Мы выбрали глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу (ГАФД) в качестве объекта для изучения модифицирующего действия NO, а также влияния модификаций на свойства белка. ГАФД является ключевым ферментом гликолиза. Одним из важных аспектов изучения ГАФД является её способность подвергаться различным посттрансляционным модификациям, таким как окисление, S-нитрозилирование и S-глутатионилирование.

Целью данной работы было выяснение механизма S-нитрозилирования ГАФД и последствий окислительного и нитрозативного стресса на взаимодействие ГАФД с другими белками.

В рамках данной работы были впервые детектированы формы ГАФД-SNO и ГАФД-SOH после инкубации с донором NO (DEANO) методами ESI и MALDI-TOF-масс-спектрометрии. Продемонстрировано количественное распределение продуктов NO-модификации ГАФД. Было показано, что инкубация ГАФД с DEANO приводит к инактивации фермента вследствие модификации каталитического цистеинового остатка (Cys152).

Была предложена схема образования продуктов модификации ГАФД. Предложенная схема подтверждалась экспериментами на клеточной культуре HEK 293T. Доказано, что S-глутатионилирование менее обратимо по сравнению с S-нитрозилированием, и, следовательно, S-глутатионилированная ГАФД может накапливаться в клетках.

Впервые показана возможность переноса NO-группы с ГАФД-SNO на G-актин in vitro. Методом MALDI-TOF-масс-спектрометрии было идентифицировано, что NO-группа переходит с Cys152 ГАФД на Сys374 актина.

Полученные результаты расширяют теоретические представления о механизмах модификации ГАФД донором NO и дополняют предложенные гипотезы участия нитрозилированной ГАФД в апоптозе.