Диссертация

В диссертационном исследовании впервые предложена и экспериментально обоснована идея применения метода сверхэкспрессии кДНК каталитической субъединицы теломеразы (hTERT) для стабилизации свойств клеток-продуцентов в культуре с целью получения клеточного секретома, стабильного по своим качественным и количественным характеристикам, в объеме, достаточном для широкомасштабного клинического применения. Обоснована возможность и рациональность применения метода сверхэкспрессии hTERT для создания адекватных клеточных моделей с целью решения фундаментальных задач регенеративной биомедицины, равно как и для получения культур мезенхимных стромальных клеток (МСК) как продуцентов секретома. С этой целью проведено комплексное исследование влияния сверхэкспрессии hTERT на свойства культур МСК жировой ткани человека (включая чувствительность к широкому спектру гормональных стимулов) и их секретома (состав, включая содержание нейротрофических и проангиогенных, провоспалительных и противовоспалительных факторов, основных компонентов SASP, внеклеточных везикул, функциональную активность в моделях нейритогенеза и фиброза, трансформирующие свойства). Создана и охарактеризована культура МСКTERT, которая может быть использована как клеточная модель и как продуцент секретома вплоть до 40х и 30х пассажей соответственно. Предложен ряд рекомендаций по получению и характеризации клеточных культур, сверхэкспрессирующих hTERT.