Диссертация

Видеотрансляция защиты будет доступна на сайте биологического факультета МГУ: https://bio.msu.ru. Задать вопросы соискателю, в соответствии с процедурой, а также направить запрос на подключение во время научной дискуссии можно ученому секретарю в течение заседания по защите на адрес электронной почты диссертационного совета.

АННОТАЦИЯ:

Объектом исследования были мыши с полным удалением генов, кодирующих лимфотоксин α, TNF или TNFR1, а также мыши с тканеспецифичным удалением гена, кодирующего лимфотоксин α, в ILC3 (RORγt+), Т-клетках (CD4+) и В-клетках (CD19+) в возрасте 8-12 недель, полученные на генетической основе C57BL/6. Экспериментальные группы формировали с участием мышей обоих полов. В качестве контрольных мышей использовали мышей C57BL/6 в случае мышей с полным удалением LTα, TNF или TNFR1, или мышей, не несущих Cre-рекомбиназу из того же помета, что и мыши с генетическим удалением Lta в определенном типе клеток. Целью настоящей работы было определение нейроиммунных, а также некоторых гомеостатических функций лимфотоксинов. Методология и предмет исследования Изучение роли лимфотоксина α в гомеостазе тонкого кишечника и дифференцировке миелоидных клеток проводили на мышах с полным удалением Lta или Tnf, полученных с помощью технологии Cre-loxP (LtaΔ/Δ и Tnf Δ/Δ). Исследование содержания ILC3 в собственной пластинке тонкого кишечника проводили с помощью цитофлуориметрического анализа. Дополнительно проводили анализ состояния иммунной системы LtaΔ/Δ мышей в норме с помощью мультиплексного анализа цитокинов и поляризации Т-клеток in vitro. Изучение роли лимфотоксинов в патогенезе аутоиммунных заболеваний проводили на мышах с полным (LtaΔ/Δ) или тканеспецифичным удалением Lta в ILC3, Т- и В-клетках. В качестве модели аутоиммунного заболевания использовали широко распространенную модель рассеянного склероза на мышах – экспериментальный аутоиммунный энцефаломиелит (EAE). Индукцию заболевания осуществляли иммунизацией MOG35-55-пептидом (для преимущественного развития Т-клеточнозависимого ответа) или полноразмерным белком rhMOG1-125 (для преимущественного развития аутоантительного ответа) в полном адъюванте Фрейнда с последующим двукратным введением коклюшного токсина для повышения проницаемости гематоэнцефалического барьера. Клинические симптомы заболевания оценивали по стандартной шкале, вклад клеточных источников лимфотоксинов в патогенез ЕАЕ оценивали с помощью проточной цитофлуориметрии, гистологического анализа, анализа экспрессии генов в ЦНС и иммуноферментного анализа. Основные положения, выносимые на защиту 1. В гомеостазе лимфотоксин α важен для поддержания популяции лимфоцитов врожденного иммунитета типа 3 (ILC3) в тонком кишечнике и для дифференцировки миелоидных клеток в моноциты in vitro. 2. Полная генетическая и фармакологическая инактивация лимфотоксинов не влияет на чувствительность мышей к экспериментальному аутоиммунному энцефаломиелиту. 3. Функции лимфотоксинов в модели нейровоспаления разделены по клеткам-продуцентам, локализации и времени заболевания.