Диссертация

Диссертация посвящена изучению экспрессии гена SERPINA1, кодирующего альфа1-антитрипсин (ААТ), в клеточных линиях человека. Дефицит ААТ, вызванный мутациями в гене SERPINA1, является предпосылкой развития целого ряда заболеваний с фоновым воспалительным компонентом, а повышение экспрессии и экспрессия de novo ассоциированы с развитием онкологических заболеваний. Ограниченный протеолиз ААТ, считающийся единственным путем, приводит к образованию биоактивных С-концевых пептидов, кодируемых экзоном 5 гена и вносящих вклад в патогенез некоторых заболеваний. В то же время, прицельных исследований экспрессии гена на уровне трансляции, а именно возможности синтеза альтернативных изо(протео)форм ААТ, и условий, при которых этот синтез реализуется, ранее не проводилось. Синтез единственно признанного продукта трансляции, секреторного ААТ, воспринимался как данность. Цель работы: идентификация спектра изоформ мРНК гена SERPINA1, продуцируемых опухолевыми клеточными линиями человека, и их продуктов трансляции. В работе использовались современные методы молекулярной и клеточной биологии, иммунобиохимические методы, методы цито- и иммунофлуоресцентной микроскопии, математического и статистического анализа. Впервые показано, что в составе длинных транскриптов, содержащих главную ОРС, транслируется альтОРС с внутреннего старт-кодона с образованием внутриклеточной изоформы ААТ. Впервые детектированы короткие транскрипты, содержащие экзон 5, и показана их роль как источника С-концевых пептидов. Химерные продукты трансляции с альтОРС и предполагаемые эндогенные продукты локализуются в клеточных компартментах, не характерных для секреторного ААТ. Данные свидетельствуют о том, что биологическое разнообразие продуктов гена SERPINA1 повышается за счет реализации альтернативных сайтов инициации трансляции. Обнаружение ряда альтернативных протеоформ ААТ и механизмов их образования, а в перспективе их физиологических функций, открывает новые возможности для более глубокого понимания развития заболеваний, что может быть использовано в прикладных целях.