Диссертация

Прямая трансляция защиты диссертации будет доступна в день защиты с 14:00 по ссылке https://www.bio.msu.ru/dissertations/view.php?ID=1013 Объектами исследований данной работы были серпины растений: CmPS1 и AtSERPIN1. Целью данной работы являлась проверка и характеризация их способности ко взаимодействию с РНК. В исследовании использовался, прежде всего, анализ методом сдвига в агарозном геле, а также различные методы молекулярной биологии и генной инженерии: клонирование белок-кодирующей последовательности в плазмиды, сайт-направленный мутагенез, наработка, очистка и ренатурация рекомбинантных белков, транзиентная экспрессия в клетках растений с помощью агроинфильтрации, конфокальная лазерная сканирующая микроскопия, аффинное выделение и детекция РНК-белковых комплексов, транскрипция in vitro, секвенирование, биоинформатический анализ. Получены следующие результаты: оба белка обладают способностью связывать РНК in vitro, при этом образуют предположительно специфический комплекс с тРНК. Опыты с транскриптами показали, что для образования такого комплекса не требуются какие-либо посттранкрипционные модификации, и узнавание происходит за счёт трёхмерной структуры РНК. В частности, показана необходимость наличия неспаренных нуклеотидов.