Диссертация

Настоящая диссертация на соискание степени кандидата биологических наук является научно-квалификационной. В на основании выполненных соискателем исследований в бесклеточной системе трансляции на основе экстракта зародышей пшеницы выявлено влияние одной транслируемой мРНК на другую. Разработанный метод детекции флуоресцентно-меченной мРНК в седиментационном профиле полирибосом позволяет отслеживать с высокой степенью детализации включение мРНК в трансляцию, что существенно улучшает данный классический метод исследования аппарата трансляции (анализ полирибосомного профиля после центрифугирования в градиенте концентрации сахарозы). С помощью этого метода было показано, что вновь добавленная мРНК включается в трансляцию, а прежде сформированные полирибосомы при этом уменьшаются в размере. Последнее демонстрирует, что размер полирибосом в данной системе трансляции можно контролировать, добавляя новые порции мРНК. Вторая половина работы показывает, что вновь добавляемая мРНК немедленно индуцирует освобождение синтезированного белка из прежде транслирующих рибосом. Предполагается, что этап инициации трансляции на вновь добавленной мРНК стимулирует терминацию на ранее транслируемых мРНК. Данный феномен исследован как со стороны специфичности вновь добавляемой мРНК, так и со стороны особенностей её инициации трансляции. Теоретическая значимость проделанной работы обоснована актуальностью исследования процесса терминации трансляции у эукариот в последнее время, а описанное влияние процессов трансляции друг на друга, происходящих на разных мРНК, является абсолютно новым в данной области молекулярной биологии. Полученные соискателем результаты исследования могут послужить основой для дальнейшей оптимизации реакторов биосинтеза белка, которые часто используют для наработки белков в коммерческих целях, в том числе для медицинских нужд.