Диссертация

Видеотрансляция защиты будет доступна на сайте биологического факультета МГУ: https://bio.msu.ru. Задать вопросы соискателю, в соответствии с процедурой, а также направить запрос на подключение во время научной дискуссии можно ученому секретарю в течение заседания по защите на адрес электронной почты диссертационного совета.

АННОТАЦИЯ:

Толл-подобные рецепторы (TLR) и рецепторы семейства IL-1R играют ключевую роль в запуске и регуляции иммунного ответа высших животных на микробные и иные повреждающие факторы. TIR домены присутствуют в цитоплазматической части рецепторов обоих семейств и ответственны за сигнал-зависимое рекрутирование адаптерных белков, которые также содержат TIR домены, к рецепторам при активации. Предметом данного исследования являются механизмы взаимного распознавания TIR доменов, подлежащие начальные этапы сборки цитоплазматического сигнального комплекса при активации TLR. Практическая значимость работы заключается в разработке молекулярных инструментов для подавления рекрутирования адаптерных белков активированными TLR и последующей блокировки передачи TLR-сигнала. В работе были применены следующие методические подходы: скрининг пептидных библиотек, представляющих вероятные сайты TIR-TIR распознавания, на способность отдельных пептидов блокировать функцию TLR; анализ эволюционной изменчивости TIR доменов с целью выявления мотивов белковых последовательностей, характеризующих функционально специализированные группы доменов; анализ связывания пептидов, проявляющих выраженные ингибиторные свойства, с отдельными TIR доменами; а также детальная характеристика функциональных свойств идентифицированных ингибиторных пептидов в моделях in vitro и in vivo.

В ходе исследований было определено положение сайтов, осуществляющих сигнал-зависимые взаимодействия TIR доменов, и предложена модель их взаимодействия в первичном сигнальном комплексе при активации TLR. Предложенная модель постулирует, что начальный этап сборки сигнального комплекса осуществляется за счёт четырёх сайтов связывания, топология которых сохранна в TIR доменах как TLR, так и их адаптерных белков. Общих мотивов белковой последовательности, характерных для сайтов TIR-TIR связывания, обнаружено не было, однако такие мотивы обнаруживались в отдельных сайтах связывания TIR доменов ортологичных белков. Практическим результатом работы явилось создание коллекции ингибиторных пептидов, некоторые из которых способны блокировать сигнализацию нескольких TLR; тогда как другие ингибиторные пептиды были специфичны к отдельным членам семейства TLR. Активность ингибиторных пептидов была подтверждена в экспериментах in vivo – в частности, была показана возможность специфической системной блокировки TLR сигнала идентифицированными ингибиторными пептидами в экспериментах на мышах.