Диссертация

Целью настоящей работы явилось исследование особенностей и механизмов экспрессии BDNF в отделах головного мозга крыс при спонтанной отмене морфина, а также оценка потенциальной взаимосвязи NO и BDNF при реализации синдрома отмены. При опийной абстиненции уровень мРНК BDNF повышался в гиппокампе, среднем мозге и фронтальной коре, при этом повышение уровня белка BDNF наблюдалось только во фронтальной коре. Указанные изменения специфичны для абстиненции, поскольку при острой и субхронической интоксикации морфином изменений уровня BDNF в ЦНС крыс зафиксировано не было. Повышение уровня мРНК BDNF, содержащей экзон I, во фронтальной коре при абстиненции сопровождалось повышением связывания транскрипционного фактора CREB (cAMP responsive element binding protein) с соответствующими регуляторными участками гена BDNF. Кроме того, было установлено, что увеличение экспрессии BDNF может быть связано со сниженной деградацией мРНК BDNF посредством микроРНК. Еще одним механизмом, обеспечивающим функциональную активность BDNF может быть регуляция посредством РНК-связывающих белков, так было установлено, что уровень нейрон-специфического белка HuD, связывающего AU-богатые элементы (ELAV-like protein 4, также известный как HU-antigen D) расположенные в некодирующей области мРНК BDNF, снижается во фронтальной коре крыс при интоксикации, но не при отмене морфина. Установлено, что регион-специфические изменения концентрация NOx- и цГМФ коррелируют с поведенческими проявлениями абстиненции. Посредством введения ингибитора NO-синтазы в период формирования зависимости от морфина исследовали роль NO в регуляции экспрессии BDNF в отделах головного мозга крыс при абстиненции. Было установлено, что при ингибировании синтеза NO наблюдается снижение уровня BDNF в отделах головного мозга, индуцированного абстиненцией, что сопровождалось усилением абстинентных расстройств, что дает косвенные указания на функциональную значимость изменений уровня BDNF при отмене морфина. Действительно, однократное введение BDNF в вентральную область покрышки в период отмены морфина ослабляет выраженность поведенческих проявлений отмены. Кроме того, в тесте условной реакции предпочтения места, индуцированного морфином, установлено, что однократное введение BDNF в срединную вентральную область покрышки перед фазой обусловливания может ослаблять подкрепляющие свойства морфина. Отмена морфина и алкогольная абстиненция характеризуются регион-специфическими особенностями экспрессии BDNF как на уровне транскрипции, так и на посттранскрипционном уровне. Так было установлено, что при ранней алкогольной абстиненции изменения экспрессии BDNF в гиппокампе происходят за счет транскрипционной регуляции активности экзона VI, при этом направление изменений зависят от паттерна потребления этилового спирта. Кроме того, есть схожие эффекты: как и в случае с отменой морфина, стимуляция сигналинга BDNF частично ослабляет проявления ранней алкогольной абстиненции. Таким образом, показано, что уровень BDNF в отделах головного мозга крыс при опийной абстиненции регулируется на транскрипционном и посттранскрипционном уровнях, при этом, взаимодействуя с NO, сигнальные каскады, опосредуемые BDNF, могут проявлять антиабстинентные свойства.