Warning: Undefined property: Dissovet\Models\Dissertation::$performed_in_place2 in /var/www/application/Models/Dissertation.php on line 354
Диссертация

Диссертация

Глухов Григорий Сергеевич

Кандидат наук

Статус диссертации

29.06.2018 
Диплом Кандидат наук
18.06.2018 
Решение о выдаче диплома
20.04.2018 
Положительное заключение АК
29.03.2018 
На рассмотрении в АК
22.02.2018 
Положительная защита
21.12.2017 
Объявление опубликовано
14.12.2017 
Принят к защите
11.12.2017 
Заключение комиссии
07.12.2017 
Документы приняты
ФИО соискателя
Глухов Григорий Сергеевич
Степень на присвоение
Кандидат наук
Приказ о выдаче диплома
№ 839 от 29.06.2018
Дата и время защиты
22.02.2018 16:00
Научный руководитель
Соколова Ольга Сергеевна
Доктор наук Доцент
Оппоненты
Максимов Георгий Владимирович
Доктор наук Профессор
Чупин Владимир Викторович
Доктор наук Профессор
Шенкарёв Захар Олегович
Доктор наук
Место выполнения работы
Московский государственный университет имени М.В.Ломоносова, Биологический факультет, Кафедра биоинженерии
Специальность
03.01.02 Биофизика
биологические науки
Диссертационный совет
Телефон совета
+7 495 939-02-89

Цели и задачи Целью данного исследования было изучение влияния мутаций на структуру, межбелковые взаимодействия и кластеризацию катионных каналов in vitro. Для достижения цели были поставлены следующие задачи: 1. Изучение кластеризации мутантного грамицидина в модельных липосомах с помощью криоэлектронной микроскопии; 2. Расчет трёхмерной реконструкции канала Kv10.2 c удаленным N- концевым доменом с помощью электронной микроскопии макромолекул; 3. Изучение влияния N-концевого домена на функциональное состояние канала Kv10.2 и транспорт его к мембране; 5 4. Изучение взаимодействия каналов Kv10.2 с цитоскелетом и его кластеризации в клеточной мембране. Научная новизна и практическая значимость работы В данной диссертационной работе с помощью метода просвечивающей электронной крио-микроскопии была впервые показана олигомеризация мутантного грамицидина в липосомах с образованием пентамера с порой в центре, способной пропускать высокомолекулярные соединения и получена трехмерная реконструкция олигомера мутантного грамицидина,. Впервые в гетерологичной системе экспрессированы калиевые каналы человека Kv10.2 с удаленными N-концевыми доменами в положениях: Δ2-24, Δ2-134 Δ24-134. Изучено распределение мутантных каналов в клетках COS1 и их солокализация с актиновым цитоскелетом. Исследованы их электрофизиологические свойства. Получена впервые структура канала Kv10.2Δ24-134 с использованием метода электронной микроскопии макромолекул. Предложена модель активации каналов Kv10.2. Полученные результаты могут быть использованы при разработке новых методов направленного мутагенеза с целью регуляции активации ионных каналов, а также в учебном процессе при модификации существующих и разработке новых образовательных курсов для студентов высших учебных заведений. Положения, выносимые на защиту 1. При замене аланина в третьем положении на лизин [Lys3]gA образует в модельных мембранах кластеры диаметром 40Å, имеющие пятилучевую симметрию и состоящие из 10 пептидов. Кластеры имеют посередине пору c диаметром ~16Å, достаточную для выхода из липосом высокомолекулярных красителей; 2. Мутации в N-концевом домене (Δ2-24, Δ2-134 Δ24-134) канала Kv10.2 приводят к формированию неактивной формы тетрамерного канала. Отсутствие N-концевого домена приводит к нарушению мембранной экспрессии и к аномальной кластеризации канала в клетках. N- концевой домен канала отвечает за взаимодействие с актином; 3. Канал Kv10.2 активируется в соответствии с лиганд-рецепторным механизмом. Публикации По материалам работы опубликовано 4 статьи в журналах, входящих в перечень ВАК РФ, и 10 тезисов в сборниках научных конференций.

# Название Размер